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帶你深入了解鎳Ni柱的使用與保養(yǎng)

鎳Ni柱是大家在蛋白純化中，應用較多的一種純化柱料，屬于固定化金屬離子親和色譜中的一種，1975年由Porath等發(fā)明，其間不斷完善發(fā)展至今。原理：過渡金屬通過與電子供體配基上，能與金屬離子相互作用的羧基或氨基的電負性元素（O，N），形成較穩(wěn)定的金屬螯合物。在IMAC中，一個Ni2+有六個配位位點，被含有3，4或5個電子供體基團（配位位點）的螯合物固定在吸附劑上，而剩下未被占據(jù)的位點暴露于溶液中，能與組氨酸，半胱氨酸，和色氨酸的側(cè)鏈或組氨酸標簽的蛋白特異性結合。鎳Ni柱的使用...

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澳洲胎牛血清使用中的常見問題及處理方法

未拆封的澳洲胎牛血清，一般情況下應存放于-10℃至-20℃，在產(chǎn)品規(guī)定的效期內(nèi)均可使用，若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內(nèi)，再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融，或通過水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。完全溶解后建議盡快使用，若長時間儲存在2-8℃，胎牛血清中的各種（脂）蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能因凝集而形成沉淀或可見的混濁。總結：血清推薦在-10至-...

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新買的AusgeneX澳洲胎牛血清到手后應該注意什么？

市場上的AusgeneX澳洲胎牛血清種類繁多，魚龍混雜，使人難以分辨真?zhèn)渭捌焚|(zhì)。好不容易在眾多品牌中挑選出誠心如意的產(chǎn)品后，那我們就可以安心使用了嘛？不不不，下面小編給大家匯總小伙伴經(jīng)常咨詢的一些問題。1、為何上次購買的同一貨號的血清培養(yǎng)細胞狀態(tài)差異那么大？如何避免此影響？答：因為血清來源于動物，其組成成分有1000種左右，每個批號的組分和組分含量都是不固定的，因此批間差異是可能存在的。為了避免批間差異對細胞的影響，建議先進行批號測試，篩選合適的批號，備好庫存（血清未開封時，...

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鎳Ni柱L00666進行蛋白純化的原理與使用方法

鎳Ni柱L00666是大家在蛋白純化中，應用較多的一種純化柱料，屬于固定化金屬離子親和色譜中的一種，1975年由Porath等發(fā)明，其間不斷完善發(fā)展至今。過渡金屬通過與電子供體配基上，能與金屬離子相互作用的羧基或氨基的電負性元素（O，N），形成較穩(wěn)定的金屬螯合物。在IMAC中，一個Ni2+有六個配位位點，被含有3，4或5個電子供體基團（配位位點）的螯合物固定在吸附劑上，而剩下未被占據(jù)的位點暴露于溶液中，能與組氨酸，半胱氨酸，和色氨酸的側(cè)鏈或組氨酸標簽的蛋白特異性結合。IMAC...

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想用好eStain L1蛋白染色儀，這6步驟可不能少！

eStainL1蛋白染色儀操作簡便，將凝膠用凝膠固定夾固定后放入儀器內(nèi)，儀器將自動注入染色液以及脫色液，在儀器的正負極之間形成一個很高的電場。在電場驅(qū)動下，負極濾紙中帶有負電荷的考馬斯藍染料分子發(fā)生定向移動，與膠上的蛋白分子結合，完成染色過程。未結合的染料分子繼續(xù)移動，離開膠，完成脫色過程。具體操作步驟：步驟1：當您的凝膠電泳快結束時，打開eStainL1蛋白染色儀背部的開關，同時儀器蜂鳴，此時，儀器進行開機自檢，自檢結束后主屏幕下方燈亮。步驟2：在托盤中注入適量蒸餾水，以*...

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親和層析介質(zhì)的工作原理是怎樣的？

親和層析是一種根據(jù)生物分子之間的特異相互作用來分離蛋白的層析方法，如酶和底物、受體和配體、抗體和抗原。這種作用是特異性的也是可逆的，通過這種可逆的結合和分離來達到蛋白純化的目的。生物分子與親和層析介質(zhì)上的配體通過共價鍵、范德華力、疏水力、靜電力等作用發(fā)生生物學專一性結合形成復合物，共價鏈接在載體表面的功能團配體上。蛋白質(zhì)親和層析技術通過目標蛋白質(zhì)與配體間通過特異性親和力吸附而達到分離純化的目的，具有生物專一性的特點，純化效率高。親和層析是應用生物高分子與配基可逆結合的原理，將...

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依科賽胎牛血清FSP500試用后常見的問題

客戶在收到依科賽胎牛血清FSP500后的需立即確認胎牛血清有無異常，如血清有沒有出現(xiàn)融化情況、瓶口及瓶身有無出現(xiàn)碎裂、瓶口是否密封完整等情況。血清融化方法：建議產(chǎn)品使用梯度溶解法，將血清從-20℃冰箱取出后，于2-8℃解凍過夜，并在此過程中不時輕輕搖動使之溶解均勻。那么，細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)的黑點是污染嗎？更換依科賽胎牛血清FSP500后發(fā)現(xiàn)細胞鏡下觀察有黑點，需要肉眼觀察細胞培養(yǎng)液有無混濁的情況出現(xiàn)，其次鏡下觀察細胞中的黑點是否有游動。如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就...

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AusgeneX澳洲胎牛血清使用前需要離心嗎？

血清的質(zhì)量對實驗成敗起著關鍵性作用，但血清使用不當也可能會導致血清質(zhì)量下降，造成細胞培養(yǎng)效果不理想。AusgeneX澳洲胎牛血清很珍貴，大家在血清使用時怎樣確定血清使用濃度？這個只能通過測試了。原則上血清添加量不要太多，通常分為5%、10%、20%幾檔。部分細胞原代提取時會使用20%血清，大部分細胞正常培養(yǎng)時會使用5%～10%的血清濃度。至于某一株細胞適應什么樣的血清濃度，還需要根據(jù)細胞特性、實驗目的做測試和調(diào)整。血清使用前需要離心嗎？這個問題有以下兩種可能：其一，因為血清融...

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